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不同溶劑類型與溶劑強(qiáng)度對(duì)分離的影響

2022-11-10

色譜分離中，影響選擇性和分離的因素有很多，其中流動(dòng)相中的有機(jī)溶劑類型以及不同的溶劑強(qiáng)度就是影響因素之一。對(duì)于反相色譜模式，常用的有機(jī)溶劑有甲醇、乙腈、四氫呋喃等，我們可以通過(guò)改變流動(dòng)相中有機(jī)相種類或調(diào)整其比例，來(lái)改變選擇性和分離度，以呈現(xiàn)出不同的分離效果。

應(yīng)用實(shí)例

4-（氯甲基）苯甲酸&3-（氯甲基）苯甲酸的分離

結(jié)構(gòu)如圖所示：

微信截圖_20221110150439.png

兩種物質(zhì)為間位與對(duì)位異構(gòu)體，在乙腈體系下無(wú)法實(shí)現(xiàn)完全分離。改變有機(jī)相種類后，可實(shí)現(xiàn)較好分離。

色譜條件1

色譜柱：Ultimate? XS-C18 4.6*250mm，5μm

流動(dòng)相：0.1%磷酸水和乙腈，梯度洗脫

微信截圖_20221110150513.png

分析：兩目標(biāo)峰有分離趨勢(shì)，但分離不完全，將梯度調(diào)整成等度條件。

色譜條件2

色譜柱：Ultimate? XS-C18 4.6*250mm，5μm

流動(dòng)相：0.1%磷酸水/乙腈=70/30

微信截圖_20221110150519.png

分析：分離有改善，但還是無(wú)法分離完全，且依靠調(diào)整溶劑強(qiáng)度已無(wú)法改善其分離。

色譜條件3

在該色譜柱柱上進(jìn)行方法優(yōu)化，用甲醇替換乙腈，再次進(jìn)行測(cè)試

色譜柱：Ultimate? XS-C18 4.6*250mm，5μm

流動(dòng)相：0.1%磷酸水/甲醇=60/40

微信截圖_20221110150523.png

結(jié)果：兩目標(biāo)物峰型良好，且可實(shí)現(xiàn)完全分離。