2023-02-17
在樣品檢測中,經(jīng)常會出現(xiàn)一個純度較高的單成分對照品,進樣后卻出現(xiàn)分裂峰,甚至直接呈兩個峰的狀態(tài)。除了色譜柱被污染,色譜柱損壞等原因外,還有可能是檢測方法不當,比如pH值不合適,離子試劑濃度不當?shù)仍颉?/p>
實例一(離子對試劑濃度不當):
離子對試劑與化合物結(jié)合后使保留時間得以延長,但如果離子對試劑的使用量不當,化合物與離子對結(jié)合不完整,導(dǎo)致待測成分部分結(jié)合,也會呈現(xiàn)兩種狀態(tài),導(dǎo)致峰分裂。
色譜柱:Ultimate? LP-C18 4.6×300mm,5μm
流動相:1g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=90:10
流動相:2g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=80:20
結(jié)論:離子對作為比較特殊的分離模式,其間往往作用力是多方作用,增加離子對能夠是兩個改善峰形,改善分裂峰,同時也可能需要微調(diào)其他條件來輔助。
實例二(pH值不當):
酸堿性化合物在不同pH下呈現(xiàn)不同的狀態(tài),不合適的pH條件下化合物出現(xiàn)分子態(tài)和離子態(tài)共同存在的情況,導(dǎo)致峰分裂甚至直接呈兩個峰。
色譜柱:Ultimate? LP-C18 4.6×250mm,5μm
流動相:10mmol/L磷酸二氫鉀:甲醇=80:20
結(jié)論:調(diào)整流動相的pH后,使化合物在特定環(huán)境中保持穩(wěn)定且單一的狀態(tài),從而不呈現(xiàn)分裂峰。