2023-02-20
液相色譜是我們實(shí)驗(yàn)室常用的定性定量分析儀器之一,各行各業(yè)的研發(fā)及質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室都會(huì)有他們的身影。今天我們來盤點(diǎn)一下,那些年我們用的液相色譜檢測(cè)器。
我們更常見更常用的就是紫外檢測(cè)器,大多數(shù)適用于液相分析的有機(jī)物都有紫外吸收,紫外檢測(cè)器是專屬檢測(cè)器,靈敏度高,操作相對(duì)簡(jiǎn)單。據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)收錄,紫外檢測(cè)器在液相檢測(cè)器中的使用占比可高達(dá)65%左右。
高效液相色譜儀檢測(cè)器使用比例
不同的檢測(cè)器各有優(yōu)缺點(diǎn),下表為常見幾種檢測(cè)器的比較:
1. 紫外檢測(cè)器
UV檢測(cè)器分為固定波長(zhǎng)檢測(cè)器、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器(VWD)和光電二極管陣列檢測(cè)器(PDA或DAD)。按光路系統(tǒng)來分,UV檢測(cè)器可分為單光路和雙光路兩種??勺儾ㄩL(zhǎng)檢測(cè)器又可分單波長(zhǎng)(單通道)檢測(cè)器和雙波長(zhǎng)(雙通道)檢測(cè)器。
紫外檢測(cè)器通常都是先分光,取得單色光再通過流通池,然后用光電二極管檢測(cè),因此只能獲得特定波長(zhǎng)的信號(hào)。它的工作原理是由光源產(chǎn)生波長(zhǎng)連續(xù)可調(diào)的紫外光或可見光,經(jīng)過透鏡和遮光板變成兩束平行光,無樣品通過時(shí),參比池和樣品池通過的光強(qiáng)度相等,光電管輸出相同,無信號(hào)產(chǎn)生;有樣品通過時(shí),由于樣品對(duì)光的吸收,參比池和樣品池通過的光強(qiáng)度不相等,有信號(hào)產(chǎn)生。
紫外檢測(cè)器光路圖
二極管陣列檢測(cè)器則是復(fù)色光先通過流通池,再分光,整個(gè)光譜由二極管陣列檢測(cè),因此能獲得一段光譜范圍內(nèi)的所有信號(hào)。PDA(或DAD)是一種光學(xué)多通道檢測(cè)器,它可以對(duì)每個(gè)洗脫組分進(jìn)行光譜掃描,經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后,得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性(確證是否是單一純物質(zhì)),色譜用于定量。
二極管陣列檢測(cè)器光路圖
UV檢測(cè)器的典型光源為氘燈,它發(fā)出的光在190~400nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)有適宜的光強(qiáng)度。它的定量原理是Lambert-Beer定律,即當(dāng)一束單色光透過流通池時(shí),若流動(dòng)相不吸收光,則吸收度A與吸光組分的濃度C和池的光徑長(zhǎng)度L成正比。
2. ELSD檢測(cè)器(ELSD的檢測(cè)原理分三步):
● 霧化過程
用惰性氣體或凈化空氣將色譜柱流出物霧化,流動(dòng)相和氣體混合噴成均勻的霧滴。
● 蒸發(fā)過程
在漂移管中將流動(dòng)相揮發(fā),霧滴經(jīng)過加熱的漂移管,流動(dòng)相被蒸發(fā),溶質(zhì)形成極細(xì)的顆粒。
● 檢測(cè)過程
測(cè)定留下來的樣品顆粒的光散射,溶質(zhì)顆粒氣流在檢測(cè)池被光束照射,其散射光被光電二極管轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)輸出。
ELSD可作為高效液相色譜、高速逆流色譜、超臨界流體色譜等色譜的檢測(cè)器。作為新型的通用型檢測(cè)器,它具有以下優(yōu)點(diǎn):
● ELSD檢測(cè)不依賴于樣品的光學(xué)性質(zhì),只要沸點(diǎn)小于流動(dòng)相的物質(zhì),都可以在ELSD上產(chǎn)生響應(yīng)。
● ELSD可以很好的支持梯度洗脫,蒸發(fā)光散射檢測(cè)可以消除流動(dòng)相配比變化對(duì)基線產(chǎn)生的影響。
● 輔助載氣提高了檢測(cè)靈敏度,保持檢測(cè)池內(nèi)的清潔,避免污染。
但是,相對(duì)于UV檢測(cè)器,ELSD檢測(cè)也有一定的特殊性。ELSD檢測(cè)要求流動(dòng)相及流動(dòng)相中加入的修飾劑必須有良好的揮發(fā)性,這樣就使非揮發(fā)性的緩沖鹽的應(yīng)用受到了限制。與UV檢測(cè)器相比,ELSD檢測(cè)的靈敏度略低。
紫外檢測(cè)器及蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是我們實(shí)驗(yàn)室常用的兩類檢測(cè)器,月旭科技可提供多種不同類型的液相色譜檢測(cè)器,其中ELSD5450可兼容國(guó)內(nèi)外多種品牌的液相色譜儀,成為您實(shí)驗(yàn)室液相擴(kuò)展的得力幫手。
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